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熒光顯微鏡就是在某種物質在短光波照射下即可發生熒光
點擊次數:213 發布時間:2020-11-12
  我想親們對這個話題會充滿了好奇,熒光顯微鏡就是在某種物質在短光波照射下即可發生熒光,如組織內大部分脂質和蛋白質經照射均可發出淡藍色熒光,稱為自發性熒光。它是景通顯微鏡中的其中一種。但大部分物質需要用熒光染料(如吖啶橙、異硫氰酸熒光素等)染色后,在短光波照射下才能發出熒光。在短波長光波(紫外光或紫藍色光,波長250~400nm)照射下,某些物質吸收光能,受到激發并釋放出一種能量降級的較長的光波(藍、綠、黃或紅光,波長400~800nm),這種光稱熒光。熒光顯微鏡的光源為高壓汞燈,發出的紫外光源經過激發濾光片(此濾光片可通過對標本中熒光物質合宜的激發光)過濾后射向普勒姆氏分色鏡。分色鏡將激發光向下反射,通過物鏡投射向經熒光染料染色的標本。染料被激發并釋放出熒光,通過物鏡,穿過分色鏡和目鏡即可進行觀察。目鏡下方安置有屏障濾片(只允許特定波長的熒光通過)以保護眼眼及降低視野暗度。
  30年代熒光染色即已用于細菌、霉菌等微生物及細胞、纖維等的形態觀察和研究。如用抗酸菌熒光染色法可幫助在痰中找到結核桿菌。40年代創造了熒光染料標記蛋白質的技術這種技術現已廣泛應用于免疫熒光抗體染色的常規技術中,可檢查和定位病毒、細菌、霉菌、原蟲、寄生蟲及動物和人的組織抗原與抗體,可用以探討病因及發病機理,如腎小球疾病的分類及診斷,乳頭瘤病毒與子宮頸癌的關系等。在醫學實驗研究及疾病診斷方面的用途日益廣泛。熒光顯微鏡的特點是靈敏度高,在暗視野中低濃度熒光染色即可顯示出標本內樣品的存在,其對比約為可見光顯微鏡的100倍。
  它以紫外光或蘭紫單色光激發標本的熒光。因紫外光是不可見光,故由標本發出的熒光與背景反差很大。熒光顯微鏡通常是在黑暗的背景下觀察彩色圖象的,而普通顯微鏡是在亮的背景下觀察較暗的樣品的。熒光顯微鏡的對比度約為普通顯微鏡的一百倍,因此可觀察到用普通顯微鏡看不到的結構和細節。

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