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正置熒光顯微鏡的濾色系統是如何工作的?
點擊次數:33 發布時間:2021-04-12
  正置熒光顯微鏡的濾色系統是如何工作的?
  正置熒光顯微鏡是以紫外線為光源,用以照射被檢物體,使之發出熒光,然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。用于研究細胞內物質的吸收、運輸、化學物質的分布及定位等。細胞中有些物質,如葉綠素等,受紫外線照射后可發熒光;另有一些物質本身雖不能發熒光,但如果用熒光染料或熒光抗體染色后,經紫外線照射亦可發熒光,正置熒光顯微鏡就是對這類物質進行定性和定量研究的工具之一。
  濾色系統是熒光顯微鏡的重要部位,由激發濾板和壓制濾板組成。濾板型號,各顯微鏡廠家名稱常不統一。濾板一般都以基本色調命名,前面字母代表色調,后面字母代表玻璃,數字代表型號特點。
  1.激發濾板根據光源和熒光色素的特點,可選用以下三類激發濾板,提供一定波長范圍的激發光。
  紫外光激發濾板:此濾板可使400nm以下的紫外光透過,阻擋400nm以上的可見光通過。常用型號為UG-1或UG-5,外加一塊BG-38,以除去紅色尾波。
  紫外藍光激發濾板:此濾板可使300~450nm范圍內的光通過。常用型號為ZB-2或ZB-3,外加BG-38。
  紫藍光激發濾板:它可使350~490nm的光通過。
  最大吸收峰在500nm以上者的熒光素(如羅達明色素)可用藍綠濾板(如B-7)激發。開始采用金屬膜干涉濾板,由于針對性強,波長適當,因而激發效果比較玻璃濾更好。激發濾板分薄厚兩種,一般暗視野選用薄濾板,亮視野熒光顯微鏡可選用厚一些?;疽笫且垣@得最明亮的熒光和最好的背景為準。
  2.壓制濾板壓制濾板的作用是完全阻擋激發光通過,提供相應波長范圍的熒光。與激發濾板相對應,常用以下3種壓制濾板:
  紫外光壓制濾板:可通過可見光、阻擋紫外光通過。能與UG-1或UG-5組合。
  紫藍光壓制濾板:能通過510nm以上波長的光(綠到紅),能與BG-12組合。
  紫外紫光壓制濾板:能通過460nm以上波長的光(藍到紅),可與BG-3組合。

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